Titolo Ricerca: Analisi di p66Shc nella leucemia linfatica cronica a cellule B
Soggetto proponente:FORCONI FRANCESCO
Descrizione Ricerca: Obiettivi / Finalità
La Leucemia Linfatica Cronica (LLC) è la neoplasia a cellule B più comune nel mondo occidentale, caratterizzata dall’accumulo di cellule B monoclonali CD5+ nel sangue periferico, midollo osseo e organi linfoidi periferici. Il decorso clinico della LLC è altamente variabile, va da una malattia indolente che potrebbe non richiedere alcun trattamento ad una malattia che progredisce invece rapidamente.1 Le cellule neoplastiche della LLC sono tipicamente bloccate nella fase G0/G1 del ciclo cellulare e quindi si accumulano nei tessuti a causa di una prolungata sopravvivenza.1 La LLC è una malattia principalmente dovuta a difetti di apoptosi. Una delle proteine coinvolte nei processi apoptotici è p66Shc. Questa proteina è un membro della famiglia Shc di proteine adattatrici, agisce come antagonista del segnale mitogenico ed è regolatore positivo dell’apoptosi indotta da stress ossidativo, nelle cellule T.2,3 E’ stato inoltre osservato che p66Shc è espresso nelle cellule B, e che le cellule B periferiche di topi p66Shc-/- mostrano un aumento della proliferazione e della attivazione B Cell Receptor (BCR)-dipendente. p66Shc agisce come attenuatore del signaling del BCR. In collaborazione con il Dip. di Biologia Evolutiva, presso la nostra Università, ho studiato l’espressione di p66Shc in una coorte ristretta di pazienti con LLC, ed ho osservato che esistono differenze significative dei livelli di espressione di p66Shc tra pazienti con prognosi favorevole e pazienti con prognosi sfavorevole, laddove l’espressione di p66Shc era più bassa nel gruppo a prognosi sfavorevole.4 Lo scopo generale di questo progetto è quello di ampliare la casistica per analizzare il significato clinico dei livelli di espressione del trascritto di p66Shc nella LLC. Gli endpoint di questo studio sono: 1) studiare se esiste una associazione tra p66Shc e rischio prognostico alla diagnosi di LLC, 2) studiare se esiste una associazione tra livelli di p66Shc e tempo al trattamento (TTFT), 3) studiare se esiste una associazione tra livelli di p66Shc e sopravvivenza (OS) e 4) studiare se esiste una associazione tra livelli di p66Shc e refrattarietà alla chemioterapia. |
Indicazione del Responsabile Ricerca
FORCONI FRANCESCO |
Il Responsabile del Progetto (programma o fase di esso) garantisce il rispetto delle modalità di espletamento della collaborazione oggetto del contratto stesso, al solo fine di valutare la rispondenza del risultato con quanto richiesto e la sua funzionalità rispetto agli obiettivi prefissati. |
Eventuale descrizione COMPLESSIVA Ricerca
Obiettivo / Finalità
La Leucemia Linfatica Cronica (LLC) è la neoplasia a cellule B più comune nel mondo occidentale, caratterizzata dall’accumulo di cellule B monoclonali CD5+ nel sangue periferico, midollo osseo e organi linfoidi periferici. Il decorso clinico della LLC è altamente variabile, che va da una malattia indolente che potrebbe non richiedere mai alcun trattamento ad una malattia che progredisce invece rapidamente.1 Le cellule neoplastiche della LLC sono tipicamente bloccate nella fase G0/G1 del ciclo cellulare e quindi si accumulano nei tessuti a causa di una prolungata sopravvivenza.1 La LLC è una malattia principalmente dovuta a difetti di apoptosi; sono stati infatti identificati difetti intrinseci in un vasto numero di componenti di meccanismi di apoptosi, includendo l’overespressione di proteine anti-apoptotiche e la riduzione nell’espressione di proteine pro-apoptotiche. Una delle proteine coinvolte nei processi apoptotici è p66Shc. Questa proteina è un membro della famiglia Shc di proteine adattatrici, agisce come antagonista del segnale mitogenico ed è regolatore positivo dell’apoptosi indotta da stress ossidativo, nelle cellule T.2,3 E’ stato inoltre valutata la funzione di p66Shc nelle cellule B ed è stato osservato che p66Shc è espresso nelle cellule B, ed inoltre che le cellule B periferiche di topi p66Shc-/- mostrano un aumento della proliferazione e della attivazione BCR-dipendente. E’ stato inoltre valutato se p66Shc avesse un ruolo nel controllo della sopravvivenza della cellula B, ed è stato osservato che p66Shc ha la facoltà di distaccare il B-cell receptor (BCR) dai pathways di sopravvivenza Erk e Akt-dipendenti, inducendo quindi l’apoptosi della cellula B. p66Shc agisce quindi come attenuatore del signaling del BCR. In collaborazione con il Dip. di Biologia Evolutiva, presso la nostra Università, ho studiato l’espressione di p66Shc in una coorte ristretta di pazienti con LLC, ed ho osservato che esistono differenze significative dei livelli di espressione di p66Shc tra pazienti con prognosi favorevole e pazienti con prognosi sfavorevole, laddove l’espressione di p66Shc era più bassa nel gruppo a prognosi sfavorevole.4 Lo scopo generale di questo progetto è quello di ampliare la casistica per analizzare il significato clinico dei livelli di espressione del trascritto di p66Shc nella LLC. Gli endpoint di questo studio sono: 1) studiare se esiste una associazione tra p66Shc e rischio prognostico alla diagnosi di LLC, 2) studiare se esiste una associazione tra livelli di p66Shc e tempo al trattamento (TTFT), 3) studiare se esiste una associazione tra livelli di p66Shc e sopravvivenza (OS) e 4) studiare se esiste una associazione tra livelli di p66Shc e refrattarietà alla chemioterapia (trattamenti a base di Fludarabina e/o agenti alchilanti). |
Dovranno essere indicate le fasi/sottofasi e i tempi di realizzazione del progetto (arco di tempo complessivo). Si richiede di prevedere i tempi di realizzazione anche per le fasi del progetto che si estendono oltre l'anno, anche se in modo meno puntuale. Nell'ultima colonna devono essere indicati i risultati che si intende raggiungere per ciascuna fase. Il numero delle fasi deve essere proporzionato alla durata del contratto di collaborazione. |
Descrizione fasi e sottofasi Ricerca |
Tempi di realizzazione (n. giorni) |
Obiettivi delle singole fasi |
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1 |
I livelli di espressione del trascritto di p66Shc sarà valutato in RealTime PCR (RotorGene, Explera), nelle cellule B di donatori sani e nelle cellule B di LLC |
10 |
Analisi dei livelli di espressione del trascritto di p66Shc nella LLC |
2 |
Analisi statistiche (SPSS software) dei livelli di p66Shc nelle cellule B di LLC per valutare se p66Shc correla con 1) valori prognostici noti della LLC, 2) sopravvivenza (OS), 3) tempo al trattamento e 4) refrattarietà alla chemioterapia. |
10 |
Analisi statistiche dei livelli di p66Shc in rapporto agli endpoint definiti (OS, TTFT, chemio refrattarietà |
Durata Ricerca [giorni]: 20
Il Proponente
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Il Responsabile Ricerca per accettazione della responsabilità _________________________________________ |